পরীক্ষার সারাংশ এবং ব্যাখ্যা
ম্যালেরিয়া হল একটি মশাবাহিত, হেমোলাইটিক, জ্বরজনিত অসুস্থতা যা 200 মিলিয়নেরও বেশি মানুষকে সংক্রামিত করে এবং প্রতি বছর 1 মিলিয়নেরও বেশি লোককে হত্যা করে।এটি প্লাজমোডিয়ামের চারটি প্রজাতি দ্বারা সৃষ্ট: পি. ফ্যালসিপেরাম, পি. ভাইভ্যাক্স, পি. ওভেল এবং পি. ম্যালেরিয়া।এই প্লাজমোডিয়া সমস্ত মানুষের এরিথ্রোসাইটকে সংক্রামিত করে এবং ধ্বংস করে, ঠান্ডা লাগা, জ্বর, রক্তাল্পতা এবং স্প্লেনোমেগালি তৈরি করে।P. ফ্যালসিপেরাম অন্যান্য প্লাজমোডিয়াল প্রজাতির তুলনায় বেশি গুরুতর রোগ সৃষ্টি করে এবং বেশিরভাগ ম্যালেরিয়া মৃত্যুর জন্য দায়ী।P. falciparum এবং P. vivax হল সবচেয়ে সাধারণ প্যাথোজেন, তবে প্রজাতির বন্টনে যথেষ্ট ভৌগলিক তারতম্য রয়েছে।
ঐতিহ্যগতভাবে, পেরিফেরাল রক্তের দাগযুক্ত ঘন দাগের উপর জীবের প্রদর্শনের মাধ্যমে ম্যালেরিয়া নির্ণয় করা হয়, এবং প্লাজমোডিয়ামের বিভিন্ন প্রজাতি সংক্রামিত এরিথ্রোসাইটসে তাদের উপস্থিতির দ্বারা আলাদা করা হয়।কৌশলটি সঠিক এবং নির্ভরযোগ্য রোগ নির্ণয় করতে সক্ষম, কিন্তু শুধুমাত্র যখন দক্ষ মাইক্রোস্কোপিস্ট দ্বারা সংজ্ঞায়িত প্রোটোকল 2 ব্যবহার করে সঞ্চালিত হয়, যা বিশ্বের প্রত্যন্ত এবং দরিদ্র এলাকার জন্য প্রধান বাধা উপস্থাপন করে।
ম্যালেরিয়া পিএফ/প্যান অ্যান্টিজেন র্যাপিড টেস্ট কিট এই বাধাগুলো সমাধানের জন্য তৈরি করা হয়েছে।পরীক্ষাটি P. ফ্যালসিপেরাম নির্দিষ্ট প্রোটিনের একজোড়া মনোক্লোনাল এবং পলিক্লোনাল অ্যান্টিবডি, হিস্টিডিন রিপিট প্রোটিন II (pHRP-II), এবং প্লাজমোডিয়াম ল্যাকটেট ডিহাইড্রোজেনেস (pLDH) এর একজোড়া মনোক্লোনাল অ্যান্টিবডি ব্যবহার করে, একটি প্রোটিন যা চার প্রজাতির দ্বারা উত্পাদিত হয়, প্লাসমোডিয়াম ইনফেকশন এবং প্লাসমোডিয়াম ইনফেকশনের বিভিন্ন প্রজাতির দ্বারা উত্পাদিত হয়। ফ্যালসিপেরাম এবং বা অন্য তিনটি প্লাজমোডিয়ার যেকোনো একটি।এটি পরীক্ষাগার সরঞ্জাম ছাড়াই অপ্রশিক্ষিত বা ন্যূনতম দক্ষ কর্মীদের দ্বারা সঞ্চালিত হতে পারে।
নীতি
পিএফ/প্যান ম্যালেরিয়া র্যাপিড টেস্ট কিট একটি পার্শ্বীয় প্রবাহ ক্রোমাটোগ্রাফিক ইমিউনোসাই।পরীক্ষার স্ট্রিপ উপাদানগুলি নিয়ে গঠিত: 1) একটি বারগান্ডি রঙের কনজুগেট প্যাড যার মধ্যে মাউস অ্যান্টি- pHRP-II অ্যান্টিবডি রয়েছে যা কোলয়েড গোল্ড (pHRP II-গোল্ড কনজুগেটস) এবং মাউস অ্যান্টি-pLDH অ্যান্টিবডি কোলয়েড গোল্ড (pLDH-গোল্ড কনজুগেটস) দিয়ে সংযুক্ত।
2) একটি নাইট্রোসেলুলোজ মেমব্রেন স্ট্রিপ যাতে দুটি টেস্ট ব্যান্ড (প্যান এবং পিভি ব্যান্ড) এবং একটি কন্ট্রোল ব্যান্ড (সি ব্যান্ড) থাকে।প্যান ব্যান্ডটি মনোক্লোনাল অ্যান্টি-পিএলডিএইচ অ্যান্টিবডির সাথে প্রি-কোটেড করা হয় যার দ্বারা প্লাজমোডিয়ার চারটি প্রজাতির যে কোনও একটিতে সংক্রমণ সনাক্ত করা যায়, Pf ব্যান্ডটি Pf সংক্রমণ সনাক্তকরণের জন্য পলিক্লোনাল অ্যান্টি-pHRP-II অ্যান্টিবডিগুলির সাথে প্রি-কোটেড, এবং সি ব্যান্ডটি ছাগল-বিরোধী মাউস IgG দিয়ে প্রলিপ্ত।
পরীক্ষার সময়, রক্তের নমুনার পর্যাপ্ত পরিমাণ পরীক্ষার ক্যাসেটের নমুনা কূপে (এস) বিতরণ করা হয়, বাফার ওয়েল (বি) এ একটি লাইসিস বাফার যুক্ত করা হয়।বাফারে একটি ডিটারজেন্ট রয়েছে যা লোহিত রক্তকণিকাকে লাইস করে এবং বিভিন্ন প্লাজমোডিয়াম অ্যান্টিজেন মুক্ত করে, যা ক্যাসেটে থাকা স্ট্রিপ জুড়ে কৈশিক ক্রিয়া দ্বারা স্থানান্তরিত হয়।pHRP-II যদি নমুনায় উপস্থাপন করা হয় তাহলে pHRP II-সোনার কনজুগেটের সাথে আবদ্ধ হবে।ইমিউনোকমপ্লেক্সটি তখন ঝিল্লিতে প্রি-কোটেড অ্যান্টি-pHRPII অ্যান্টিবডি দ্বারা ক্যাপচার করা হয়, একটি বারগান্ডি রঙের Pf ব্যান্ড তৈরি করে, যা Pf পজিটিভ পরীক্ষার ফলাফল নির্দেশ করে।পিএলডিএইচ যদি নমুনায় উপস্থিত থাকে তাহলে পিএলডিএইচ সোনার কনজুগেটের সাথে আবদ্ধ হবে।ইমিউনোকমপ্লেক্সটি তখন ঝিল্লির উপর প্রি-কোটেড অ্যান্টি পিএলডিএইচ অ্যান্টিবডি দ্বারা ক্যাপচার করা হয়, একটি বারগান্ডি রঙের প্যান ব্যান্ড তৈরি করে, যা প্লাজমোডিয়াম পজিটিভ পরীক্ষার ফলাফল নির্দেশ করে।প্যান ব্যান্ডের অনুপস্থিতিতে, অন্য তিনটি প্লাজমোডিয়ার যে কোনো একটির জন্য একটি ইতিবাচক পরীক্ষার ফলাফল সুপারিশ করা যেতে পারে।
কোনো টেস্ট ব্যান্ডের অনুপস্থিতি (প্যান এবং পিএফ) একটি নেতিবাচক ফলাফলের পরামর্শ দেয়।পরীক্ষাটিতে একটি অভ্যন্তরীণ নিয়ন্ত্রণ (C ব্যান্ড) রয়েছে যা ছাগল-বিরোধী ইমিউনো কমপ্লেক্সের একটি বারগান্ডি রঙের ব্যান্ড প্রদর্শন করা উচিত IgG/মাউস IgG (pHRP-II এবং pLDH-গোল্ড কনজুগেটস) পরীক্ষা ব্যান্ডগুলির যে কোনও রঙের বিকাশ নির্বিশেষে।অন্যথায়, পরীক্ষার ফলাফল অবৈধ এবং নমুনা অন্য ডিভাইসের সাথে পুনরায় পরীক্ষা করতে হবে।